影響藥敏試驗結果的因素及存在的問題
來源:北京生泰爾生物科技有限公司 發布日期:2011-04-26 發布者:曉天 共閱837次
在以紙片法進行藥敏試驗時,以下幾方面因素可影響試驗的結果:
1、培養基:首先應根據試驗菌的營養需要選擇適宜的培養基。培養基的成分的不同,不僅影響敏感菌株的生長繁殖并可影響到抑制圈的直徑。一般細菌,如大腸桿菌及葡萄球菌可使用普通營養瓊脂;做磺胺類藥物敏感試驗時應選用無蛋白胨平板;鏈球菌和巴氏桿菌可用綿羊血瓊脂平板。其次,傾注平板時,厚度應合適(約5-6mm),不可太薄,一般90mm直徑的培養皿,傾注培養基18-20ml為宜。培養基內應盡量避免有抗菌藥物的拮抗物質,如鈣、鎂離子能減低氨基糖苷類的抗菌活性,胸腺嘧啶核苷和對氨苯甲酸(PABA)能拮抗磺胺藥和TMP的活性。
2、細菌接種量:細菌接種量應恒定,如太多,抑菌圈變小,能產酶的菌株更可破壞藥物的抗菌活性。
3、藥物濃度:藥物的濃度和總量直接影響抑菌試驗的結果,需精確配制。商品藥應嚴格按照其推薦治療量配制。
4、培養時間:一般細菌培養溫度和時間為37℃ 12-24小時,有些抗菌藥擴散慢如多粘菌素,可將已放好藥敏紙片的培養基先置4℃冰箱內2-4小時,使抗菌藥預擴散,然后再放37℃溫箱中培養,可以推遲細菌的生長,而得到較明顯的抑菌圈。
藥敏試驗存在的問題
當前進行藥敏試驗仍然存在一些問題,主要包括以下幾方面:
1、方法學不統一,沒有標準化。
2、市場提供的藥敏試驗的培養基、藥敏紙片等缺乏嚴格質控,質量難以保證。所以還是建議按要求自制藥敏紙片。
3、因需要先進行細菌的分離培養,所以藥敏試驗報告出結果時間長,檢驗與臨床缺乏溝通,對于基層獸醫站或養殖場,藥敏結果不能滿足臨床治療要求,容易延誤治療時機。但根據有關報道,也可進行簡易的藥敏試驗,方法如下:無菌取病死畜禽的部分肝、脾等組織,按1:5加生理鹽水研磨制成懸液,靜置5分鐘,用無菌吸管吸懸液,加兩滴于營養瓊脂板上,涂布均勻,5分鐘后貼上藥敏試紙,培養、觀察抑菌圈大小。
4、對于部分營養需求較高的細菌或微生物,如鏈球菌和支原體,臨床上較難培養,限制了藥敏試驗的應用。
5、部分養殖場或基層獸醫站缺乏做細菌分離培養和藥敏試驗的意識。絕大多數養殖者或技術人員是在沒有明確微生物學診斷的情況下使用抗菌藥物,養殖場規模越小,細菌培養和藥敏試驗做的越少,有的養殖場輪翻使用多種抗菌藥物而不做細菌培養和藥敏試驗,致使療效不佳,治療時機延誤和藥品的浪費。一些病例用藥前不做藥敏試驗,而是在大量使用多種抗菌藥物療效不明顯時才想起做細菌培養和藥敏試驗,而此時細菌已對多種抗菌藥產生耐藥性。
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