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資訊
精準·省心·可靠
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1、配制0.9% 鹽水
稱9克氯化鈉放入鹽水瓶,加蒸餾水達1000ml,緊塞瓶口后,放進蒸鍋消毒,開水蒸煮30分鐘,冷卻后即可使用。0.9%等滲生理鹽水是用來清洗各類與精液直接接觸的器皿。此鹽水的濃度與精液滲透壓相近,不會引起精蟲的死亡,如用蒸餾水,將使精蟲致死。
2、玫瑰紅染色液配制
稱3克玫瑰紅,加入99ml蒸餾水,用玻璃棒攪勻后,再加1ml40%福爾馬林。此稀釋劑用于對精蟲進行染色,以便于檢查異常的精子。
3、稀釋液配制
精液稀釋液是與新鮮精液滲透壓接近,用于擴大精液容量,給精子提供營養、中和精子代謝產物、保持精液PH值的生理溶液。
4、采精量測定
按照規范的采精操作,公豬的采精量一般在100~500ml,平均220ml。每頭公豬的采精量應相對比較穩定。如果公豬的采精量超出正常范圍, 或與以往采精量明顯不同,應注意查找原因。公豬精液的比重約為1.02克/ml,接近于1,因此,適合用稱重的方法來測量采精量。每克重量精液的體積約為1ml。
5、精液稀釋與保存
(1) 精液的稀釋
精液稀釋時,一定要強調原精液與稀釋液的溫度要盡量一致,溫度相差在2℃以內。根據計算所得的稀釋后總精液體積,緩緩加入稀釋液,稀釋液加入應沿著杯壁倒入,禁止將稀釋液從高處倒入,形成沖擊力。稀釋液的最終加入量應使精液和稀釋液的總體積達到所計算的稀釋后體積(或重量)。加入稀釋液過程中,應一邊加入稀釋液,一邊輕輕搖動燒杯或用潔凈的玻璃棒攪拌。
(2) 精液的分裝
精液稀釋5分鐘后,應再一次檢查精子活力,如果活力沒有下降,方可進行分裝。調好精液分裝機,以每80~100ml為單位,將精液分裝至精液瓶或袋。實驗室室溫最好控制在20~25℃,以免在精液稀釋分裝處理過程中, 精液受到環境溫度的影響??諝庵械难鯕獠焕诰拥谋4?,因此,精液封裝時應盡可能將其中存留的空氣排出。
精液瓶在擰上蓋子時,先將瓶蓋旋大半圈左右,然后擠壓瓶體使精液液面上升至瓶口,再旋緊,以排出瓶中空氣。袋裝精液在封口時,也應先將其中的空氣擠壓,使精液面上升到接近封口處的高度,再用熱封口機熱封。
(3) 精液的保存
A、保存溫度:稀釋好的精液應保存在有報警裝置的電子恒溫箱中,恒溫箱內溫度保持在16~18℃;
B、每隔12個小時輕輕翻動一次,防止精子沉淀而引起死亡;
C、稀釋的精液可在保溫箱內保存約3天。超過3天的精液,質量將開始下降,不能用于人工授精;
D、輸精前作精液檢查:向試管倒入1~2ml精液,把試管放在37~38℃的恒溫水浴箱中加溫5分鐘,取出精液輕輕搖勻,用已滅菌的滴管取1滴放于預熱的載玻片,置于37℃的恒溫板上片刻,用顯微鏡檢查活力,精液活力≥ 0.7,方可使用。
6、精液的運輸
精液運輸應置于保溫箱內,保持在16~18℃,運輸過程中避免強烈震動。