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  • 父母代蛋種雞場雞白痢凈化和維持的關鍵措施
    來源:  發布日期:2016-10-17  發布者:佚名  共閱809次

    【摘要】雞白痢沙門茵病是危害養禽業的重要疫病,主要由受感染的雞只(包括發病雞或外觀健康帶菌雞)通過個體間的水平傳播和經種蛋傳給下一代的垂直傳播而引起感染和疾病的擴散。文章從雞白痢沙門菌的傳播方式、污染關鍵點、檢疫凈化,尤其是父母代蛋種雞沙門菌陰性群的維持措施等方面進行了分析。為制定父母代蛋種雞的沙門茵凈化與防控措施提供參考。

    雞白痢是由雞白痢沙門菌引起的急性敗血性傳染病,主要侵害雛雞,以白痢、衰竭和敗血癥過程為特征,常導致大批死亡…。成年雞感染后多呈慢性經過或不顯癥狀,但帶菌可垂直傳播給下一代或通過生殖道污染禽蛋而造成種蛋的孵化率降低。目前,我國部分蛋雞場雞白痢沙門菌陽性率較高,蛋雞沙門菌凈化存在的主要問題有:缺乏快速、準確的病原和抗體檢測技術;蛋種雞凈化不徹底,造成商品蛋雞中感染逐代放大;飼料、飲水、飼養環境中沙門菌污染。我國養禽業雞白痢沙門菌病的凈化已開展了幾十年,但由于工作的持續性、嚴格性均存在較大不足,國家也尚未制定相應的凈化標準,迄今為止尚未有種禽公司(除從國外已凈化公司完全引進祖代或者父母代的之外)宣布已達到完全凈化的標準。同時,韋平課題組在對養雞一條龍集團公司的跟蹤檢測發現,病原一直在種雞群體內循環感染。因此,種群凈化是防控該病的重要途徑。

    針對這些產業問題,國家蛋雞產業技術體系進行了蛋雞沙門菌凈化技術的研究和示范,并將6此列為國家蛋雞產業技術體系重點任務,其中包括蛋雞和蛋品中沙門菌抗原和抗體快速檢測平臺技術和蛋種雞群沙門菌的檢疫凈化控制技術,研制沙門菌快速檢測試劑盒,應用建立的沙門菌病原和抗體快速檢測平臺,對蛋種雞、商品蛋雞進行全面的檢疫,淘汰沙門菌陽性雞和陽性種蛋,每個雞群經過2—4次檢疫凈化,培育無雞白痢和腸炎沙門菌感染的雞群。

    1 雞白痢沙門菌的檢測方法

    對種雞場采取定期檢疫、淘汰帶菌雞同時結合生物安全措施,是目前控制和凈化此病的最有效措施。從樣品中分離鑒定出雞白痢沙門菌是診斷雞白痢較為可靠的方法。除此以外,應用較為廣泛的主要有血清學方法和分子生物學方法。

    1.1血清學方法

    血清學試驗是確定雞群感染和流行情況的常規方法。全血平板凝集試驗(PAT)、瓊脂擴散試驗(AGPT)n3、間接血凝試驗(PHA)[8 3等方法在國內應用較多。OIE認為用脂多糖(LPS)作為包被抗原,是測定雞群中雞白痢、雞傷寒沙門菌感染最特異的方法。

    蔣維維等提出,PAT效率較血清平板凝集試驗(SAT)高,但檢出率不如后者。實踐中還要綜合考慮采血環節中技術人員的熟練程度、雞的生理、器械的好壞、組員間的配合等因素,選擇合適的檢測技術。

    曹春梅等引用膠體金標記雞傷寒沙門菌LPS抗原,建立了一種抗原夾心法快速檢測雞白痢、雞傷寒沙門菌抗體的斑點免疫金滲濾法(DIGFA)。與PAT相比,DIGFA具有靈敏度更高、早檢測到抗體、陽性樣品抗體滴度更高、準確性更強的優點。徐耀輝等…j以辣根過氧化物酶標記的沙門菌O,單克隆抗體3—47—0與包被的雞白痢沙門菌脂多糖抗原,建立了一種抗體阻斷ELISA以檢測雞白痢和雞傷寒沙門菌感染。該方法具有很強的區分能力。在人工感染試驗中,從第2周開始,該方法能從全部雞只中檢測到特異性抗體,比全血平板凝集試驗(PAT)早1周時間,特異性和敏感性也更高。此外,該方法也能檢測出與雞白痢和雞傷寒沙門菌有共同抗原的沙門菌感染產生的抗體。

    1.2分子生物學方法

    分子生物學診斷技術以其更高的特異性和靈敏性在雞白痢沙門菌病診斷上的應用越來越多。根據雞白痢沙門菌與雞傷寒沙門菌的帕5基因在第237和598位堿基的不同,耿士忠等設計和合成了等位基因特異性PCR引物,建立了快速檢測雞白痢沙門菌的PCR方法,該PCR方法能夠特異性地鑒定雞白痢沙門菌,檢測靈敏度達100Pg DNA,與常規檢測方法符合率為94.3%。薛俊龍等[1引用雞白痢沙門菌/tic基因序列建立特異性PCR診斷方法,此PCR體系能檢出50 pg以上的細菌DNA,陽性檢出率和敏感性均高于常規檢測方法。李求春[141從雞白痢沙門菌中克隆了大小為840 bp的ipaJ基因序列,并獲得了體外原核表達的大小為37 ku融合蛋白,該蛋白可與雞白痢沙門菌陽性血清反應。對105株雞白痢沙門菌菌株的PCR檢測結果顯示,所有的菌株都能擴增出ipaJ基因,該基因廣泛存在于雞白痢沙門菌菌株中,具有免疫原性。

    同時,近兩年王紅寧課題組建立了多重PCR技術檢測腸炎沙門菌、雞白痢沙門菌和傷寒沙門菌的方法,沙門菌LAMP快速檢測方法和一種沙門菌特異性免疫磁珠一多重PCR快速檢測方法等。其中多重PCR檢測技術重點優化擴增所用的Extag酶,降低了PCR的檢測限,提高反應的靈敏度,比其他Tag酶具備更高的穩定性。該方法的建立,縮短了樣品檢測時間(8~16 h),可重復性強(4次試驗重復率大99%),準確率高。沙門菌LAMP快速檢測方法主要是在反應前體系中加人優化配置的鈣黃綠素——MnCl:溶液作為指示劑,反應后可根據顏色變化肉眼判定結果,避免了反應后開蓋判定帶來的假陽性干擾。

    沙門菌特異性免疫磁珠——多重PCR通過針對沙門菌外膜蛋白基因OmpC設計引物,進行該基因的擴增、克隆和表達,之后將純化的蛋白作為抗原免疫新西蘭兔,制備沙門菌特異性抗體并包被磁珠載體,構建沙門菌特異性免疫磁珠,將免疫磁珠同多重PCR相結合,并對方法進行靈敏性試驗、特異性試驗,建立了一種快速檢測方法。這一方法的靈敏度比普通PCR方法高10倍,而且免疫磁珠能夠對樣品中的沙門菌進行濃縮富集,能夠代替沙門菌繁瑣的增菌過程,節約檢測時間42—48 h。

    2雞白痢的傳播方式和主要污染源

    雞白痢的傳播方式較多,病雞、帶菌雞是主要的傳染源,通過帶菌蛋傳播是最常見的傳播途徑。帶菌蛋有的是從帶菌雞所產的蛋而來,有的是健康蛋殼污染病菌而成為感染蛋。染菌蛋孵化會形成死胚或孵出病雛雞。病雛雞含有的大量病菌通過污染飼料、飲水、孵化器、育雛器等再次進行傳播。與病雛雞共同飼養的健康雛雞可通過消化道,有時經呼吸道或眼結膜而受感染,被感染的雛雞大部分死亡。耐過的雞長期帶菌,成為傳染源,可周而復始地代代相傳。

    飼料和飲水沙門菌污染也是引起雞白痢的重要原因。韓志輝¨51通過常規分離培養鑒定技術,對某飼料廠102份成品飼料、97份魚粉、98份肉骨粉進行了沙門菌的分離與鑒定,結果從297份樣品中分離到沙門菌45株,分離率15.2%。成品飼料陽性率17.6%(13/102),魚粉陽性率為14.4%(14/97),肉骨粉陽性率為13.3%(13/98)。

    鼠害、貓、狗、鳥和昆蟲等帶菌動物可直接感染易感雞群或間接污染飼料原料、飼料成品或水源來感染雞群。同時,病雞糞便含有大量細菌,飼料、飲水和用具被污染后,是傳播的重要因素。當飼養管理差,雛雞擁擠,通風不良,溫度過高或過低,以及發生其他疫病時,都可以成為雞白痢的誘因。

    3父母代蛋種雞場雞白痢的凈化和防控

    3.1雞場選址建設要科學

    雞場的選址和布局決定了雞場的生物安全體系是否健全,這是對疫病有效隔離及防控的重要一環。首先,充分考慮好雞場的地理位置和外部環境。從雞場的位置、占地面積、地形地勢、土質、水源等方面進行全面的考慮。第二,在內部建設時,劃分功能單元、合理布局,昆合種雞場的育雛育成與商品代養殖舍要分區布局,區與區之間拉開距離,同時要滿足各區全進全出的要求引。具備防鼠、鳥和昆蟲等設施。生產區和生活區嚴格分開,生產區凈道和污道分開,防止交叉感染。有一定距離的緩沖防疫隔離帶,四周砌圍墻或綠色隔離帶與外界隔離。

    3.2引種要規范

    要選擇一家管理規范、品種來源純正、遺傳性狀比較穩定、種源干凈且無垂直傳播疫病或無主要垂直傳播病的祖代種雞場引種,要求祖代陽性率不超過0.1%,防止雞沙門菌隨種源帶入。

    3.3檢疫凈化雞群

    通過全血平板凝集試驗,檢出并淘汰陽性種雞。種母雞13~18周齡進行第一次抽檢,抽檢數量為10%,種公雞全檢,淘汰陽性雞,之后每月全檢;種母雞40周齡起進行第二次抽檢,抽檢數量為10%,方法同上。如雞白痢沙門菌陽性率超過0.3%,對種雞群全檢,淘汰陽性雞,保證種雞群白痢沙門菌陽性率低于0.3%。

    3.4加強飼養管理

    在養雞生產中,育雛始終是關鍵,也是重點。溫度、濕度、通風、光照應嚴格控制。雛雞應給予顆?;暳?,并少喂勤添。育雛的飲用水要定期檢測,確保菌落總數達標且無沙門菌,育雛的第1周要飲用溫開水,在飲水中適量添加高敏抗生素,預防雞白痢沙門菌早期感染。

    加強雞舍的通風換氣,保持雞舍環境溫度適宜,空氣干燥,降低沙門菌生存和感染的可能性。在加強日常衛生管理和消毒措施及提高飼養管理水平的同時,尤其是雞籠的滾蛋網要每天清掃干凈,防止種蛋污染。對健康雞群進行定期預防性用藥,所使用的藥物都具有高敏性。對采用人工受精的父母代蛋種雞場,要采用一雞一管人工授精方法,減少沙門菌的橫向傳播。


    采取合理的通風模式。李保明口副建議采用能使風由側墻直接進到天花板的模式。國外采用的纖維壓制板,風的滲透能力強,通過這種板可以均勻輸送冷空氣,結合籠中間的管道通風效果較好。另外,對排出的空氣進行過濾消毒處理,有利于持續保障場區環境。

    優化免疫程序。部分階段用聯苗替代單苗,在減少油乳劑疫苗次數、減少應激的同時,確保種雞群不發生疫情,減少繼發沙門菌的幾率。

    3.5嚴格消毒

    種雞場要對雞舍、種蛋、孵化場和用具等進行嚴格消毒。雞舍要定期使用高效低毒的消毒液帶雞消毒,消毒液的品種每周要更換,循環使用。進入雞舍的蛋托都要經過沖洗消毒處理;每2 h揀1次種蛋,立即熏蒸消毒,減少蛋殼表面的細菌侵入蛋內。每隔2周對雞舍內的空氣、塵埃及糞便采樣,進行沙門菌檢測,保證檢測結果均為陰性。種蛋挑選要嚴格,臟蛋、次蛋都要剔除;種蛋選好人孵前再進行一次熏蒸消毒;要確保孵化廳和疫苗注射室正壓送風、出雛廳和存雛廳是負壓通風;孵化廳要定期全面消毒。每次出雛后,要對出雛廳、孵化器及用具進行徹底地清掃消毒。疫苗注射室要潔凈,連續注射器、針頭等用具要經高溫消毒后使用,稀釋疫苗最好采用一次性注射器。每小時更換1次連續注射器,每100只雛雞更換1個針頭。定期對孵化廳進行消毒內的空氣和塵埃進行沙門菌檢測,檢測結果應為陰性。

    在消毒液研發方面,鄭煒超等n鍆研制的新型微酸性電解水機,可連續穩定生產適用于畜禽場消毒的高濃度微酸性電解水,可快速殺滅各種病原菌和病毒,對于發展無害化綠色健康養殖具有重要的意義。微酸性電解水消毒對蛋雞舍內沙門菌的凈化效果,表明微酸性電解水對不同種類沙門菌的殺菌效果與作用時間、有效氯濃度和溫度呈正比關系,對車輛表面的沙門菌的消毒效果顯著高于復合酚。

    3.6杜絕飼料、飲水污染雞白痢沙門菌嚴把飼料進貨渠道,倉庫門口設擋鼠板,不使用易遭沙門菌污染的飼料原料,做到混合飼料當天生產,當天用完,避免污染。袋裝飼料不應直接堆放在地板上,應堆放在木制托板上,以利通風。

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